基因工程是指按照人們的愿望，進行嚴格的設(shè)計，通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。接下來學(xué)習(xí)啦小編為你整理高二生物選修三基因工程知識點，一起看看吧!

　　高二生物選修三基因工程知識點【一】

　　基因工程的基本操作程序

　　1.目的基因是指： 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 。

　　(1)獲取方法：從基因文庫中獲取目的基因

　　(2)人工合成法：化學(xué)方法合成DNA片段(反轉(zhuǎn)錄法、直接合成法)

　　(3)PCR反應(yīng)擴增DNA

　　2.PCR技術(shù)擴增目的基因

　　(1)PCR的含義：聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。

　　(2)目的：獲取大量的目的基因

　　(3)原理：DNA雙鏈復(fù)制

　　(4)過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈為單鏈;

　　第二步：冷卻到55～60℃，引物與兩條單鏈DNA結(jié)合;

　　第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始進行互補鏈的合成。

　　高二生物選修三基因工程知識點【二】

　　基因表達載體的構(gòu)建(核心)

　　1.目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。

　　2.組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因

　　(1)啟動子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。

　　(2)終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ，位于基因的尾端。

　　(3)標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。常用的標記基因是抗生素基因。

　　3.重組質(zhì)粒形成過程:

　　(1)用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個切口，露出黏性末端。

　　(2)用同一種限制酶切斷目的基因，使其產(chǎn)生相同的黏性末端。

　　(3)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處，再加入適量DNA連接酶，形成了一個重組DNA分子(重組質(zhì)粒)

　　高二生物選修三基因工程知識點【三】

　　將目的基因?qū)胧荏w細胞—轉(zhuǎn)化

　　1.轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。 2.常用的轉(zhuǎn)化方法：

　　將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ?農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有 基因槍法和 花粉 管通道法等。

　　將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ?顯微注射技術(shù)。方法的受體細胞多是 受精卵。

　　將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是 繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少，最常用的原核細胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用 Ca2+ 處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞 ，再將重組表達載體DNA分子 溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。

　　3.重組細胞導(dǎo)入受體細胞后，篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是標記基因是否表達。

　　高二生物選修三基因工程知識點【四】

　　目的基因的檢測和表達

　　1.首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交(DNA-DNA)技術(shù)。

　　2.其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，方法是采用分子雜交(DNA-RNA)技術(shù)。

　　3.最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是采用抗原—抗體雜交技術(shù)。

　　4.有時還需進行個體生物學(xué)水平的鑒定。如生物抗蟲或抗病的鑒定等。