殺菌劑對玉米頂腐病菌的抑菌效果測定分析

　　摘要：室內(nèi)抑菌、毒力測定表明，不同殺菌劑對玉米(Zea mays L.)頂腐病菌(Fusarium subglutinans)菌絲生長的抑制作用不同;玉米頂腐病菌對化學(xué)殺菌劑表現(xiàn)敏感，但是敏感程度不同。篩選出10%環(huán)唑醇、10%丙環(huán)唑、12.5%腈菌唑、50%退菌特等對玉米頂腐病菌抑制效果較好的藥劑，可作為防治該病害的首選藥劑。

　　關(guān)鍵詞：殺菌劑;玉米(Zea mays L.);頂腐病菌(Fusarium subglutinans);抑菌效果

　　玉米(Zea mays L.)頂腐病是世界玉米生產(chǎn)上的重要病害，也是我國玉米生產(chǎn)上的主要病害之一，在我國各地都有不同程度的發(fā)生，是制約玉米生產(chǎn)的重要因素。玉米頂腐病于1998年在遼寧省阜新地區(qū)首次被發(fā)現(xiàn)，是我國玉米生產(chǎn)上發(fā)生的一種新病害，在遼寧、吉林、黑龍江、甘肅、新疆等省(自治區(qū))嚴重發(fā)生，許多地塊因此病造成毀種。近年來該病的發(fā)生有上升趨勢，2006年在遼寧、吉林等地突發(fā)流行，重病田塊發(fā)病率高達50%。生產(chǎn)上對玉米頂腐病的防治研究報道甚少。近年來的生產(chǎn)實踐表明，在種植特用玉米及玉米制種田該病發(fā)生較嚴重時采用化學(xué)防治也有一定作用。為此，我們選用目前生產(chǎn)上較常使用的農(nóng)藥進行藥劑對菌絲擴展抑制作用試驗，以期篩選出對該病有較好防效的藥劑，供生產(chǎn)上防病應(yīng)用。

　　1 材料與方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 菌株 供試菌株玉米頂腐病致病菌亞黏團鐮孢菌(Fusarium subglutinans)是從遼寧省黑山縣采集的玉米頂腐病病株按常規(guī)組織分離法進行分離培養(yǎng)獲得的，經(jīng)純化培養(yǎng)后冷藏備用。

　　1.1.2 殺菌劑 供試的16種殺菌劑名稱、應(yīng)用濃度及來源見表1。

　　1.2 方法

　　殺菌劑抑菌效果測定：采用菌絲生長速率測定法，供試藥劑分別用無菌水稀釋成所需濃度藥液，將PDA培養(yǎng)基加熱熔化，待其冷卻至45 ℃左右時，取1 mL藥液加入到9 mL PDA培養(yǎng)基中，制成含不同藥劑的培養(yǎng)基，充分搖勻后迅速倒入滅菌的直徑9 cm的培養(yǎng)皿中，以加入等體積無菌水的無藥劑的PDA平板為對照。待培養(yǎng)基凝固后，用打孔器在菌落邊緣切取直徑7 mm的菌碟塊，菌絲面朝下置于含藥PDA平板中央，每皿1塊，每處理3次重復(fù)，置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 5 d后，用十字交叉法測量菌落直徑，并計算不同藥劑處理對菌絲生長的抑制率，分析比較不同殺菌劑對菌絲生長的影響。

　　菌絲生長抑制率計算公式：

　　菌絲生長抑制率=

　　■×100%

　　不同藥劑的毒力曲線測定：從上述的16種殺菌劑中初步篩選出對菌絲生長有較強抑制作用的藥劑進行抑菌測定。每種藥劑設(shè)5個濃度，用無菌水將藥劑配成10倍于試驗濃度的系列濃度梯度藥液。取1 mL藥液與9 mL PDA培養(yǎng)基混合獲得系列濃度的含藥培養(yǎng)基，從菌落邊緣截取直徑為5 mm的菌絲塊置于含藥平板中央，每皿1塊，每種藥劑每個濃度設(shè)置3次重復(fù)，以加入等體積無菌水的無藥劑的PDA平板為對照。置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 d后，用十字交叉法測量菌落直徑，計算各濃度含藥培養(yǎng)基對菌絲生長的抑制率，計算出每種藥劑的毒力回歸方程及EC50。

　　具體方法：將抑制率轉(zhuǎn)化為抑制率機率值，以藥劑濃度的對數(shù)值為橫坐標，以抑制率機率值為縱坐標，利用最小二乘法分別求出各藥劑的毒力回歸方程Y=bX+a，把Y=5(抑制率為50%的機率值)代入各毒力方程求出X，再轉(zhuǎn)換成有效中濃度(EC50)，最后以EC50值來衡量殺菌劑對病菌菌絲毒力的大小。

　　2 結(jié)果與分析

　　2.1 不同藥劑對玉米頂腐病菌絲生長的抑制效果

　　菌絲生長速率法測定結(jié)果(表2)表明，不同藥劑對病菌菌絲生長的抑制效果存在顯著差異。在供試的16種藥劑中，以10%環(huán)唑醇、10%丙環(huán)唑、12.5%腈菌唑、50%退菌特對病菌的抑制效果最好，抑制率達到100%;其次是75%百菌清，抑菌率達88.9%;50%多菌靈的抑制作用最差，僅有8.3%。

　　2.2 不同藥劑對玉米頂腐病菌的EC50值比較

　　各單劑毒力回歸方程、斜率、EC50和相關(guān)系數(shù)結(jié)果見表3。各供試藥劑對玉米頂腐病菌的EC50之間存在差異，即表明各藥劑對玉米頂腐病菌的毒力存在一定差異。環(huán)唑醇的抑菌效果最好，毒力最強，EC50最小，僅為1.51 μg/mL;腈菌唑、丙環(huán)唑的EC50值分別為1.86、2.59 μg/mL。說明這2種藥劑對玉米頂腐病菌的毒力較強，抑菌效果較好;退菌特的EC50值為11.49 μg/mL，說明該藥劑對野生型病菌的抑制效果相對較差，毒力相對較弱。

　　2.3 玉米頂腐病菌對不同藥劑的敏感性比較

　　將試驗結(jié)果進行相關(guān)回歸分析得出每種藥劑的回歸方程和斜率(表3)?；貧w方程的斜率與殺菌劑對病菌的敏感性成正相關(guān)，斜率越大，藥劑隨著濃度的增大抑菌效果提高的越快。在供試的4種藥劑中，退菌特的斜率最大，其值為0.982 6，說明病菌對該藥劑的敏感性最高;其次依次為丙環(huán)唑、腈菌唑，斜率值分別為0.727 9、0.670 3，說明病菌對這2種藥劑的敏感性較高;環(huán)唑醇的斜率值為0.627 5，是供試藥劑中斜率最小的，說明玉米頂腐病病菌對這種藥劑的敏感性較低。

　　室內(nèi)毒力測定中藥劑的EC50值越小、斜率越大，說明病菌對藥劑的敏感性越高，抑菌效果越好。綜合考慮供試藥劑的EC50值和斜率，結(jié)果表明對玉米頂腐病菌抑制效果最好的藥劑為丙環(huán)唑和環(huán)唑醇，可作為防治該病害的首選藥劑。

　　3 小結(jié)

　　對16種供試藥劑的室內(nèi)抑菌測定試驗結(jié)果表明，不同藥劑對菌絲生長的抑制作用差異顯著，以10%環(huán)唑醇、10%丙環(huán)唑、12.5%腈菌唑、50%退菌特的抑制效果最好，抑制率達到100%。

　　室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明，玉米頂腐病菌對化學(xué)藥劑的敏感程度不同。綜合考慮供試藥劑的EC50值和斜率，對玉米頂腐病菌抑制效果較好的藥劑為10%環(huán)唑醇、10%丙環(huán)唑、12.5%腈菌唑、50%退菌特，可作為防治該病害的首選藥劑。

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