生物科技知識

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　　生物科技知識：

　　1、 細(xì)胞脫分化：就是讓已經(jīng)分化的細(xì)胞，經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過程。創(chuàng)傷和外源激素可以使外植體細(xì)胞的合成代謝加強(qiáng)，不斷分裂增殖形成愈傷組織。

　　2、 植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給與適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整植株。

　　3、 植物體細(xì)胞雜交就是將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培養(yǎng)成新的植物體的技術(shù)。

　　4、 植物細(xì)胞工程的實際應(yīng)用：植物繁殖的新途徑(微繁、作物脫毒、制造人工種子)、作物新品種的培育(單倍體育種、體細(xì)胞誘變育種等)、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)(人參細(xì)胞發(fā)酵罐生產(chǎn)人參皂苷)。

　　5、 動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有：動物細(xì)胞培養(yǎng)(基礎(chǔ))、動物細(xì)胞融合、動物細(xì)胞核移植、生產(chǎn)單克隆抗體等。

　　6、 動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細(xì)胞(胰蛋白酶或膠原蛋白酶)，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。

　　7、 限制酶：主要從原核生物中分離純化出來，能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。形成黏性末端和平末端兩種。

　　8、 DNA連接酶：根據(jù)酶的來源不同分為兩類：E.coliDNA連接酶、T4DNA連接酶。二者都是將雙連DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

　　9、 常用的運載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒。質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細(xì)菌染色體之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。

　　10、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。

　　11、受體細(xì)胞有植物、動物、微生物之分。

　　12、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，是否可以維持和表達(dá)其遺傳特性，只有通過檢測與鑒定才能知道。這是基因工程的第四步工作。

　　13、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法、基因槍法。

　　14、將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞的方法：顯微注射技術(shù)。

　　15、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：用CaCl2處理，增大細(xì)胞壁的通透性。

　　16、檢測目的基因是否插入到受體細(xì)胞的基因組中，是否轉(zhuǎn)錄出mRNA的方法：DNA分子雜交技術(shù)(用目的基因做探針，如果顯示出雜交帶則成功)。

　　17、目的基因的獲取：從已有物種中直接分離，也可以人工合成。

　　18、目的基因：主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因，也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。

　　19、PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫，是一種在生物體外復(fù)制特定DNA片斷的核酸合成技術(shù)。其原理是：DNA雙連復(fù)制的原理。前提是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物(兩種)。過程是：高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸。

　　20、植物基因工程碩果累累：抗蟲轉(zhuǎn)基因植物，抗病轉(zhuǎn)基因植物，抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。

　　21、DNA重組技術(shù)，實現(xiàn)這一精確的操作過程至少需要三種工具，即準(zhǔn)確切割DNA的“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)、將DNA片斷再連接起來的“分子縫合針”——DNA連接酶、將體外重組好的DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞的“運輸工具”——運載體。

　　22、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其目的是：是目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用。其組成是：目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因(鑒定受體細(xì)胞是否含有目的基因，便于篩選)。

　　23、檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)的方法：抗原——抗體雜交。

　　24、除了分子檢測外，有時還需要進(jìn)行個體水平的鑒定，方法是：抗蟲或抗病的接種實驗。

　　25、動物基因工程前景廣闊：用于提高動物的生長速度，用于改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)，用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物，用轉(zhuǎn)基因動物做器官移植的供體，基因工程藥品異軍突起。

　　26、基因治療：是把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的。這是治療遺傳病的最有效的手段。其中效果比較可靠的是體外基因治療。

　　27、基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。

　　28、蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找出相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)。

　　29、具有某種生物全部遺傳信息的任何一個細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整生物體的潛能，也就是說，每個生物細(xì)胞都具有全能性的特點。

　　30、植物細(xì)胞工程：植物組織培養(yǎng)技術(shù)(基礎(chǔ))、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)。

　　現(xiàn)代生物科技必記知識點歸納

　　1、 動物細(xì)胞融合的方法：物理方法(離心、振動、電刺激)、化學(xué)方法(聚乙二醇)、滅活的病毒。

　　2、 單克隆抗體的制備：骨髓瘤細(xì)胞和已免疫的小鼠脾臟中的B淋巴細(xì)胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長，這種雜交細(xì)胞的特點是：既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。對上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。最后，將雜交瘤細(xì)胞在體外進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，這樣，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，就可以提取大量的單克隆抗體了。

　　3、 單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可以大量制備。

　　4、 單克隆抗體的應(yīng)用：作為診斷試劑(在診斷的應(yīng)用上具有準(zhǔn)確、高效、快速、簡易的優(yōu)點。)、用于治療疾病和運載藥物。(制成“生物導(dǎo)彈”借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用，將藥物定向帶到癌細(xì)胞，在原位殺死癌細(xì)胞，這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。)

　　5、 精子的發(fā)生大體可以分為三個階段：第一階段，位于曲細(xì)精管管壁的精原細(xì)胞先分裂為兩個細(xì)胞，然后繼續(xù)數(shù)次有絲分裂產(chǎn)生多個初級精母細(xì)胞;第二階段，初級精母細(xì)胞連續(xù)兩次分裂;第三階段，圓形的精子細(xì)胞變形成精子，其中細(xì)胞核變?yōu)榫宇^部，高爾基體發(fā)育為頭部的頂體，中心體演變?yōu)榫拥奈玻€粒體聚集在尾的基部形成線粒體鞘膜。

　　6、 受精：是精子與卵子結(jié)合形成合子的過程。包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段：準(zhǔn)備階段1——精子獲能，準(zhǔn)備階段2——卵子的準(zhǔn)備，受精階段主要包括：精子穿越放射冠和透明帶，進(jìn)入卵黃膜，原核形成和配子結(jié)合(受精過程中，首先發(fā)生頂體反應(yīng);在精子觸及卵黃膜的瞬間，發(fā)生透明帶反應(yīng)，這是防止多精入卵的第一道屏障;精子入卵后，發(fā)生卵黃膜封閉作用，這是防治多精入卵的第二道屏障。)

　　7、 一個卵泡成熟一個卵子;排卵：是指卵子從卵泡中排出;剛排出的卵子尚未完全成熟，需要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟直到MII中期才能與精子在輸卵管內(nèi)結(jié)合完成受精。

　　8、 胚胎移植實際上是生產(chǎn)胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過程，優(yōu)勢是可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力，大大縮短了供體本身的繁育周期，是良種畜群迅速擴(kuò)大。

　　9、 胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：供體與受體相同的生理變化;胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài);子宮不對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng);胚胎遺傳性狀不受受體任何影響。

　　10、胚胎移植的基本程序：對供體和受體的選擇和處理(同期發(fā)情處理，超數(shù)排卵處理)、配種或進(jìn)行人工授精、對胚胎的收集檢查培養(yǎng)或保存、進(jìn)行胚胎移植。

　　11、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：無菌、無毒的環(huán)境;營養(yǎng)與體內(nèi)基本相同;適宜的溫度和pH;氣體環(huán)境(主要是氧氣和二氧化碳，二氧化碳是維持培養(yǎng)液的pH，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于95%的空氣加5%的CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng))。

　　12、動物核移植是將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。

　　13、哺乳動物核移植分為：胚胎細(xì)胞核移植、體細(xì)胞核移植。

　　14、體細(xì)胞核移植的應(yīng)用前景：轉(zhuǎn)基因克隆動物可以促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育;保護(hù)瀕危物種;作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)醫(yī)用蛋白;作為異種移植的供體;核移植胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化成相應(yīng)的組織器官用于器官移植。

　　15、動物細(xì)胞培養(yǎng)時制備的細(xì)胞懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁，要求培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖稱為細(xì)胞的接觸抑制。

　　16、動物細(xì)胞融合也稱為細(xì)胞雜交，是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。融合后形成的具有原來兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞。

　　17、卵子是否受精的標(biāo)志：在卵黃膜和透明帶的間隙觀察到兩個極體時。

　　18、胚胎的發(fā)育：卵裂期、桑椹胚、囊胚、原腸胚、組織器官形成。

　　19、胚胎工程技術(shù)：體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植(是最后一道工序)、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞。

　　20、體外受精：主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精

　　21、胚胎分割：是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2、4或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。

　　22、胚胎干細(xì)胞：簡稱ES或EK細(xì)胞，是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。形態(tài)上：體積小，細(xì)胞核大、核仁明顯;功能上：具有發(fā)育的全能性：體外培養(yǎng)時可以增殖而不發(fā)生分化。應(yīng)用價值：ES細(xì)胞可以用于治療人類的某些頑癥(老年癡呆、帕金森)、體外定向誘導(dǎo)分化培育出人造組織器官，解決臨床供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題。

　　23、轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全(滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變)、生物安全(對生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)。

　　24、面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法：趨利避害，不能因噎廢食。

　　25、關(guān)注生物技術(shù)的倫理問題：中國政府對克隆技術(shù)的態(tài)度：禁止生殖性克隆人，不反對治療性克隆。四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實驗。