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      高二生物下冊《血紅蛋白的提取和分離》知識(shí)梳理

      時(shí)間: 舒雯911 分享

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        高二生物下冊《血紅蛋白的提取和分離》知識(shí)梳理

        一、基礎(chǔ)知識(shí):

        1 、分離生物大分子的基本思路是什么?

        2 、不同蛋白質(zhì)的特性在哪些方面存在差異?

        3 、本課題我們將利用血紅蛋白與雜質(zhì)蛋白哪方面的差異進(jìn)行提純?

        4 、為什么不用雞的血紅細(xì)胞而用人的血紅細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料?

        5 、用什么方法分離相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì) ?

        凝膠色譜法

       ?、?凝膠色譜法(分配色譜法):

        1、什么是凝膠?

        2、什么是凝膠色譜法?

        學(xué)生活動(dòng)2:

        3、凝膠色譜法的原理是什么?

        4、請用自己的話總結(jié)出凝膠色譜法分離相對分子質(zhì)量不同蛋白質(zhì)的具體過程。

        1 、什么是緩沖液?

        2、 緩沖液的作用是什么?

        學(xué)生活動(dòng)3:

        3、 緩沖液是如何配置的?你所學(xué)過的人體

        血液的緩沖液有哪些?

        4、 本實(shí)驗(yàn)加的是什么緩沖液?為何要加緩沖液?

        (二)、緩沖溶液

        1 、什么是電泳?

        2、 影響電泳遷移速度的因素有哪些?

        學(xué)生活動(dòng)4:

        4、電泳分離各種分子的原理是什么?

        (三)、電泳

        3、 如何消除電荷對電泳遷移速度的影響?

        5 、請描述電泳的過程?

        電泳檢測結(jié)果

        二、實(shí)驗(yàn)操作

        蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步:

        (1)樣品處理:包括洗滌紅細(xì)胞;血紅蛋白稀釋;離心等操作收集到的血紅蛋白溶液。

        (2)粗分離:透析除去分子較小的雜質(zhì)。

        (3)純化:通過凝膠色譜法將分子量較大的雜質(zhì)蛋白質(zhì)除去。

        (4)純度鑒定:通過聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定。

        (一)樣品處理

        1、紅細(xì)胞的洗滌:

        目的是去除雜蛋白。要加入檸檬酸鈉防止血液凝固;離心將血液分層,用膠頭吸管吸出黃色血漿;用生理鹽水洗滌。

        2、血紅蛋白的釋放:

        在蒸餾水和甲苯作用下,紅細(xì)胞破裂釋放

        3、分離血紅蛋白溶液:

        離心分層;濾紙過濾去除脂溶性沉淀層;分液漏斗分出紅色透明液體。

        4、透析:

        裝入透析袋并置于磷酸緩沖液中(PH為7.0)透析。

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