高中生物實驗知識點復習(3)
二、觀察細胞有絲分裂的實驗過程
步驟 | 注意問題 | 分析 |
二、裝片的制作 （解離→漂洗→染色→制片） 1．解離： 解離液：質量分數(shù)為15%的鹽酸和體積分數(shù)為95%的酒精的混合液（1：1） | 解離時間要保證，細胞才能分散開來。 解離時間也不宜過長。 | 目的：溶解細胞間質，使組織中的細胞相互分離開來。此時，細胞已被鹽酸殺死。 否則，根尖過于酥軟，無法取出。 |
2．漂洗：清水的玻璃皿中漂洗約10 min。 | 漂洗要充分，可換水1~2次。 | 目的：洗去解離液，便于染色。 |
3．染色：質量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。 | 染色時間不宜過長，否則顯微鏡下一片紫色，無法觀察。 | 龍膽紫等為堿性染料，可使染色體著色。醋酸洋紅溶液也能使染色體著色 |
4．制片：用鑷子將這段洋蔥根尖取出來，放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片。然后，用拇指輕輕地壓載玻片，使細胞分散開來。 | 要弄碎根尖，再垂直向下均勻用力壓片，不可移動蓋玻片， | 目的：使細胞分散，避免細胞重疊，便于觀察。做得成功的裝片，標本被壓成云霧狀。 |
三、觀察 1．低倍鏡觀察：把裝片放在低倍鏡下，慢慢移動裝片，找到分生區(qū)細胞。 2．高倍鏡觀察：移走低倍鏡，換上高倍鏡，用細準焦螺旋和反光鏡把視野調整清晰，仔細觀察，找出處于細胞分裂期中期的細胞，再找出前期、后期、末期的細胞。 | 一定要找到分生區(qū)。 在一個視野里，往往不容易找全有絲分裂過程中各個時期的細胞?？梢月匾苿友b片，從鄰近的分生區(qū)細胞中尋找。 | 分生區(qū)細胞特點是：細胞呈正方形，排列緊密，有的細胞正處于分裂期。 |
三、討論
制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵是什么?
答：制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵有以下幾點：
(1)剪取洋蔥根尖材料時，應該在洋蔥根尖細胞一天之中分裂最活躍的時間;
(2)解離時，要將根尖細胞殺死，細胞間質被溶解，使細胞容易分離;
(3)壓片時，用力的大小要適當，要使根尖被壓平，細胞分散開
實驗十五 低溫誘導染色體加倍
一、實驗原理與步驟：
原理：用低溫處理植物分生組織細胞，能抑制紡錘體的形成，以致影響染色體被拉向兩極，細胞也不能分裂成兩個子細胞，于是，植物細胞的染色體數(shù)發(fā)生變化。
步驟：⑴低溫誘導。⑵卡諾氏液中浸泡以固定細胞的形態(tài)，再用95%的酒精沖洗2次。⑶制作裝片(解離、漂洗、染色、制片)。⑷顯微鏡觀察。
二、課后討論題答案：
低溫誘導和秋水仙素處理都是通過抑制分裂細胞內紡錘體的形成，使染色體不能移向細胞兩極，而引起細胞內染色體數(shù)目加倍。卡諾氏固定液(Carnoy's Fluid) 適用于一般植物組織和細胞的固定,常用于根尖,花藥壓片及子房石蠟切片等.有極快的滲透力,根尖材料固定15—20min即可,花藥則需1h左右,此液固定最多不超過24h,固定后用95%酒精沖洗至不含冰醋酸為止;如果材料不馬上用,需轉入70%酒精中保存.固定液的重要特性是能迅速穿透細胞，將其固定并維持染色體結構的完整性，還要能夠增強染色體的嗜堿性，達到優(yōu)良染色效果。
配方：無水酒精3份、冰醋酸1份、或無水乙醇6份，氯仿3份，冰醋酸1份。
實驗十六 調查常見的人類遺傳病
一、實驗原理與步驟：
原理：顯性遺傳病具有世代相傳的特點，隱性遺傳病隔代出現(xiàn)。伴X染色體隱性遺傳病的遺傳特點是交叉遺傳，隔代出現(xiàn)，患者男性多于女性。伴X染色體顯性遺傳病的遺傳特點是世代相傳，患者女性多于男性。
步驟：①確定要調查的遺傳病，掌握其癥狀及表現(xiàn) ②設計記錄表格及調查要點③分多個小組調查，獲得足夠大的群體調查數(shù)據(jù)④匯總結果，統(tǒng)計分析
二、注意事項：
1、調查時，最好選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病，如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等
2、為保證調查的群體足夠大，小組調查的數(shù)據(jù)，應在班級和年級中進行匯總
某遺傳病的發(fā)病率=某種遺傳病的患病人數(shù)/某種遺傳病的被調查人數(shù)
實驗十七 探究生長素類似物促進插條生根的最適濃度
一、實驗原理：
植物插條經(jīng)生長素類似物處理后，對植物插條的生根情況有很大的影響，而且用不同濃度、不同時間處理其影響程度亦不同。其影響存在一個最適濃度，在此濃度下植物插條的生根數(shù)量最多，生長最快。
二、實驗注意事項
1. 選擇插條：以1年生苗木為最好(1年或2年生枝條形成層細胞分裂能力強、發(fā)育快、易成活)
2. 處理插條：枝條的形態(tài)學上端為平面，下端要削成斜面，這樣在扦插后可增加吸收水分的面積，促進成活。
3. 處理方法：
1)浸泡法：把插條的基部浸泡在配制好的溶液中，深約3cm，處理幾小時至一天。(要求的溶液濃度較低，并且最好是在遮陰和空氣濕度較高的地方進行處理)
2)沾蘸法：把插條基部在濃度較高的藥液中蘸一下(約5s)，深約1.5cm即可。
實驗十八 探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化
一、實驗原理：
1.在含糖的液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)中酵母菌繁殖很快，迅速形成一個封閉容器內的酵母菌種群，通過細胞計數(shù)可以測定封閉容器內的酵母菌種群隨時間而發(fā)生的數(shù)量變化。
2.養(yǎng)分、空間、溫度和有毒排泄物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長的限制因素。
二、酵母菌計數(shù)方法：抽樣檢測法或顯微計數(shù)法(用血球計數(shù)板)。
先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入。多余培養(yǎng)液用濾紙吸去。稍待片刻，待細菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部，將計數(shù)板放在載物臺的中央，計數(shù)一個小方格內的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算試管中的酵母菌總數(shù)。
注意：從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾次。
實驗十九 土壤中動物類群豐富度的研究
一、實驗原理：
1.土壤不僅為植物提供水分和礦質元素，也是一些動物的良好棲息場所。研究土壤中動物類群的豐富度，操作簡便，有助于理解群落的基本特征與結構。
2.許多土壤動物有較強的活動能力，而且身體微小，因此不能用樣方法或標志重捕法進行調查。在進行這類研究時，常用取樣器取樣的方法進行采集、調查，即：用一定規(guī)格的捕捉器(如采集缺罐、吸蟲器等進行取樣)。
二、豐富度的統(tǒng)計方法：記名計算法和目測估計法。
記名計算法是指在一定面積的樣地中，直接數(shù)出各種群的個體數(shù)目，這一般用于個體較大，種群數(shù)量有限的群落。
目測估計法是按預先確定的多度等級來估計單位面積上個體數(shù)量的多少。等級的劃分和表示方法有：“非常多、多、較多、較少、少、很少”等等。
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