岡崎片段產(chǎn)生的原因是什么
岡崎片段,是指在DNA雙鏈進(jìn)行半保留復(fù)制時(shí),在復(fù)制點(diǎn)附近新合成的與親代DNA鏈互補(bǔ)的DNA片段。下面學(xué)習(xí)啦給大家分析岡崎片段產(chǎn)生的原因,希望能幫到大家。
岡崎片段產(chǎn)生的原因是什么
岡崎片段(英語:Okazaki fragment)是DNA復(fù)制過程中,一段屬于不連續(xù)合成的延遲股,即相對來說長度較短的DNA片段。名稱源自最早發(fā)現(xiàn)團(tuán)隊(duì)的領(lǐng)導(dǎo)者-日本名古屋大學(xué)的岡崎令治與岡崎恒子夫婦的姓氏。其團(tuán)隊(duì)在研究大腸桿菌中噬菌體DNA復(fù)制情形時(shí)發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象。
岡崎片段之所以存在,是因?yàn)镈NA聚合酶無法在樣板DNA的 5'往3'的方向上合成DNA,因此只能反向合成 在樣本DNA上產(chǎn)生了許多以5'到3'方向合成的岡崎片段(建立的片段與樣本DNA方向相反 故依舊是5'往3'),再由DNA黏合酶將其黏合。在前導(dǎo)鏈(領(lǐng)先股)上DNA的合成是連續(xù)的,在后滯鏈(延遲股)上則是不連續(xù)的。
細(xì)菌體內(nèi)的岡崎片段長約1000到2000個核苷酸,真核生物則約150到200個核苷酸。對岡崎片段的仔細(xì)研究表明,與前導(dǎo)鏈的頭幾個一樣,每一片段5'端的頭幾個核苷酸均是核糖核苷酸,因此DNA合成是由RNA引導(dǎo)的。這些引物在片段連接之前被去掉,產(chǎn)生的間隙由DNA填補(bǔ)。用RNA引導(dǎo)DNA復(fù)制的原因很可能是出于保證DNA復(fù)制的高忠實(shí)性。
岡崎片段的發(fā)現(xiàn)歷史
DNA復(fù)制過程中,2條新生鏈都只能從5‘端向3’端延伸,前導(dǎo)鏈連續(xù)合成,滯后鏈分段合成,這些分段合成的新生DNA片段稱岡崎片段,細(xì)菌岡崎片段長度1000-2000核苷酸殘基,真核生物岡崎片段長度100-200核苷酸殘基.在連續(xù)合成的前導(dǎo)鏈中,U-糖苷酶和AP內(nèi)切酶也會在錯配堿基U處切斷前導(dǎo)鏈,任何一種DNA聚合酶合成方向都是從5'向3'方向延伸,而DNA模板鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械碾p鏈,這樣在一條鏈上,DNA合成方向和復(fù)制移動方向相同(前導(dǎo)鏈),而在另一條模板上卻是相反的(后滯鏈)。那么在復(fù)制叉中新鏈?zhǔn)侨绾魏铣傻哪?1968年岡崎(Okazaki)及其同事進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn),回答了這一問題。岡崎片段名稱就是源自最早發(fā)現(xiàn)團(tuán)隊(duì)的領(lǐng)導(dǎo)者,也就是岡崎令治與岡崎恒子(一對夫妻)的姓氏。其團(tuán)隊(duì)是在研究大腸桿菌中的噬菌體DNA復(fù)制情形時(shí)發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象。
一組短的DNA片段,是在DNA復(fù)制的起始階段產(chǎn)生的,隨后又被連接酶連接形成較長的片段。在大腸桿菌生長期間,將細(xì)胞短時(shí)間地暴露在氚標(biāo)記的胸腺嘧啶中,就可證明岡崎片段的存在。岡崎片段的發(fā)現(xiàn)為DNA復(fù)制的科恩伯格機(jī)理提供了依據(jù)。
岡崎片段的DNA雙鏈
在DNA雙鏈進(jìn)行半保留復(fù)制時(shí),在復(fù)制點(diǎn)附近新合成的與親代DNA鏈互補(bǔ)的DNA片段。
岡崎片段
是岡崎令治等(1966)首先發(fā)現(xiàn)的。在大腸桿菌約為1千-2千核苷酸的長度。DNA聚合酶只使脫氧核苷酸在5′→3′的方向重合。而半保留復(fù)制在5′→3′方向重合的同時(shí),在3′→5′方向的重合也是不可缺少的。此矛盾由岡崎片段的發(fā)現(xiàn),以及在其基礎(chǔ)上的不連續(xù)復(fù)制模式而解釋了。在復(fù)制點(diǎn),如圖所示,首先由DNA聚合酶的作用,在5′→3′方向與親代DNA分子雙方的鏈互補(bǔ),由脫氧核苷酸配對重合,形成短的DNA片段,它們再由DNA連接酶的作用而結(jié)合起來形成長的DNA分子,并逐漸復(fù)制成為DNA雙鏈。
岡崎片段的遺傳信息
DNA是遺傳信息的載體,
岡崎片段
故親代DNA必須以自身分子為模板準(zhǔn)確的復(fù)制成兩個拷貝,并分配到兩個子細(xì)胞中去,完成其遺傳信息載體的使命。而DNA的雙鏈結(jié)構(gòu)對于維持這類遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性和復(fù)制的準(zhǔn)確性都是極為重要的。
DNA的半保留復(fù)制
Waston和Click在提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型時(shí)曾就DNA復(fù)制過程進(jìn)行過研究,他們推測,DNA在復(fù)制過程中堿基間的氫鍵首先斷裂,雙螺旋解旋分開,每條鏈分別作模板合成新鏈,每個子代DNA的一條鏈來自親代,另一條則是新合成的,故稱之為半保留式復(fù)制(semiconservativereplication)。
1958年Meselson和Stahl進(jìn)行了如圖8-3-5的實(shí)驗(yàn)證明了DNA分子是以半保留方式進(jìn)行自我復(fù)制的。
DNA復(fù)制的起始,方向和速度
DNA在復(fù)制時(shí),雙鏈DNA解旋成兩股分別進(jìn)行。其復(fù)制過程的復(fù)制起點(diǎn)呈現(xiàn)叉子的形式,故稱復(fù)制叉。以復(fù)制叉向前移動的方向?yàn)闃?biāo)準(zhǔn),一條模板鏈為3’—〉5’走向,在其上DNA能以5’—〉3’方向連續(xù)合成,稱為前導(dǎo)鏈(leadingstrand);另一條模板鏈為5’—〉3’走向,在其上DNA也是5’—〉3’方向合成,但與復(fù)制叉移動的方向正好相反,故隨著復(fù)制叉的移動形成許多不連續(xù)的岡崎片段,最后在連成一條完整的DNA鏈,該鏈稱為后隨鏈(laggingstrand)。實(shí)驗(yàn)證明DNA的復(fù)制是由一個固定的起始點(diǎn)開始的。一般把生物體的單個復(fù)制單位稱為復(fù)制子。一個復(fù)制子只含一個復(fù)制起點(diǎn)。一般說,細(xì)菌,病毒即線粒體DNA分子均作為單個復(fù)制子完成其復(fù)制,真核生物基因組可以同時(shí)在多個復(fù)制起點(diǎn)上進(jìn)行雙向復(fù)制,即它們的基因組包括多個復(fù)制子。多方面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大多數(shù)生物內(nèi)DNA的復(fù)制都是從固定的起始點(diǎn)以雙向等速方式進(jìn)行的。復(fù)制叉以DNA分子上某一特定順序?yàn)槠鹗键c(diǎn),向兩個方向等速生長前進(jìn)。
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